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GOLD WIP细胞裂解液让您的蛋白印迹赢在起点

作者:尚柏生物医学技术(北京)有限公司 2009-07-30T00:00 (访问量:6897)

用我们的经验为您的实验保驾护航——尚柏生物
制备组织细胞裂解物是分离蛋白质的一个重要步骤。组织细胞在特定的物理化学条件下,释放部分或全部蛋白质,通过离心等步骤加以分离,即可获得蛋白质溶液。这些蛋白可用于后续检测,如:PAGE,蛋白印迹(Western Blot),免疫沉淀(immnolprecipitation,IP),免疫共沉淀(co-IP)和蛋白与多肽的分离纯化等。要制备出优质的蛋白质溶液,裂解液的选择至关重要。
使用裂解液的主要目的有以下几种:
1)、利用去污剂破坏脂质双分子层,破裂细胞;
2)、溶解蛋白;
3)、蛋白变性使其溶解;
4)、抑制蛋白酶活性。
裂解液中的成分及其作用:
1)、Tris-HCl pH 7.4(缓冲体系,使蛋白保持最佳活性和溶解状态)
2)、NaCl(等渗体系,维持溶液渗透压)
3)、EDTA(变性剂和稳定剂,通过螯合金属离子有效抑制蛋白酶的活性)
4)、Triton x-100(破坏细胞,充分裂解细胞,释放蛋白)
5)、DTT(还原剂,防止蛋白通过巯基氧化聚合,增加蛋白的可溶性)
6)、Sodium deoxycholate(中度变性剂和蛋白溶解剂)
7)、SDS(强变性剂和蛋白溶解剂)
8)、尿素/硫脲(可以提高膜蛋白的融解)
9)、PMSF(强大的蛋白酶抑制剂)
10)、Aprotinin(蛋白酶抑制剂)
11)、Leupeptin(蛋白酶抑制剂)
调节裂解液中各个成分的配比,能使其在不同实验要求下达到最佳裂解效果。
针对组织蛋白及细胞全蛋白提取,我们为您提供了最佳解决方案。GOLD WIP组织及细胞蛋白裂解液能够在非变性条件下裂解组织细胞,不仅可以用于细胞全蛋白的提取,也可直接用于大多数动物组织的裂解。最有效地保护蛋白的同时保持蛋白原有的分子结构和蛋白间相互作用。
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