全血基因组DNA提取试剂系统
产品名称: 全血基因组DNA提取试剂系统
英文名称: Blood Genomic DNA Extraction Kit (Ethanol precipitation)
产品编号: D1850-200
产品价格: 0
产品产地: 北京/solarbio
品牌商标: Solarbio
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北京索莱宝科技有限公司--实验室产品
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全血基因组DNA提取试剂系统使用说明书 货号:D1850 规格:50T/200T 保存:室温(15℃-25℃) 干燥保存,复检期12个月,2℃-8℃保存时间更长。 产品内容: 产品说明: 产品适用于处理新鲜的或已经添加抗凝剂的血液样品,采用异丙醇沉淀方法,操作简便,尤其适合大量 提取血液基因组DNA。提取的DNA可用于PCR、酶切等常规分子生物学实验。少量样本也可选购我公司吸附 柱型试剂盒(D1800 全血基因组DNA提取试剂盒)。 本产品使用前请根据使用量将10×红细胞裂解液用水稀释成1×的即用型红细胞裂解液。 操作步骤: 以1ml全血为例 1、样品的处理:在血液中加入3倍体积的1×红细胞裂解液(请确认已经稀释过),充分颠倒混匀,12000rpm离 心1min(如为大量提取并且为大离心机,可11000转离心5min),小心吸去上清,再加入2倍体积的1×红细胞 裂解液,用移液器轻轻吹打沉淀,充分混匀,离心,弃上清,沉淀为白细胞。 2、向沉淀中加500ul白细胞裂解液,振荡或者用移液器吹打至彻底混匀。65℃水浴10-20min,期间可颠倒离 心管混匀数次,直至溶液较为清澈看不见明显细胞为止。 3、加入500ul蛋白沉淀液,充分颠倒混匀,此时会出现白色沉淀,65℃水浴5min,12000rpm离心5min,小心 吸取上清(不要吸到下层沉淀或漂浮不溶物),转移到干净离心管中,如还有沉淀物,可再次离心。 4、在上清中加入1ml异丙醇,混匀。12000rpm离心5min,可看到管底有少量白色DNA沉淀,弃掉上清。 5、向离心管中加入1ml 75%乙醇,12000rpm离心5min,弃去上清液。可再次短暂离心用移液器去除残余上清。 6、将离心管敞口置于室温或50℃温箱放置数分钟,否则乙醇可能影响后续的实验如酶切、PCR等。 7、向离心管中加入100-300ul DNA溶解液,室温放置让DNA自然溶解。如果DNA难于溶解,可室温放置过夜 货号 D1850-50T D1850-200T 10×红细胞裂解液 30ml 120ml 白细胞裂解液 30ml 120ml 蛋白沉淀液 30ml 120ml DNA溶解液 15ml 60ml 处理血液量 1ml 5ml 10ml 红细胞裂解液(1×) 5ml 25ml 50ml 白细胞裂解液 0.5ml 2.5ml 5ml 蛋白沉淀液 0.5ml 2.5ml 5ml 异丙醇 1ml 5ml 10ml 75%乙醇 1ml 5ml 10ml DNA溶解液 100ul 0.5ml 1ml 或将离心管置于50-60℃水浴中水浴加热5min。 注意事项: 1、样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DN**段较小且提取量也下降。 2、若试剂盒中的溶液出现沉淀,可在65℃水浴中重新溶解后再使用,不影响提取效果。 3、DNA浓度及纯度检测:得到的基因组DN**段的大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。 回收得到的DN**段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。DNA应在OD260处有显著吸 收峰, OD260值为1相当于大约 50 μg/ml双链DNA、40 μg/ml单链DNA。OD260/OD280比值应为1.7-1.9,如 果洗脱时不使用洗脱缓冲液,而使用去离子水,比值会偏低,因为pH值和离子存在会影响光吸收值,但 并不表示纯度低。 相关产品: D1800 全血基因组DNA 提取试剂盒 E1020 EB 染色液 D1010 6×DNA Loading Buffer T1060 50×TAE 缓冲液 T1050 5×TBE 缓冲液 M1060 D2000 DNA Ladder M1400 1kb DNA Ladder G8142 GoldView II 型核酸染色剂(5000×)