DEAE-纤维素
货号：C8930
规格：50g/100g
⼀、简介
DEAE-纤维素，它采用平均粒径为50m的颗粒型亲水高分子聚合物，表面又用大分子糖链接枝，使它有
更高的比表面积和更好的生物兼容性，它在高流水下保持更高载量，同时又具有更好的分辨率。由于比表面
积大，平衡和洗脱的时间也更短。它经过接枝即使是纯化病毒，质粒等超大分子的物质，载量基本保持不变。
本产品物理和化学稳定性好，使用寿命长，操作方便。
⼆、亲和填料特性
特点 载量大，分辨率好，流速高，使用方便。
基质 高度交联纤维素
配基 二乙基氨基乙基
配基密度 40μmol /ml
吸附载量 180mg HSA/ml
填料的颗粒大小 50μm
最大流速 300cm/h
pH范围 3-10，在位清洗时pH范围可到2-11
化学稳定性
各种缓冲液及盐，0.5M NaOH及醋酸，8M脲，6M盐酸胍，乙醇，异
丙醇等
物理稳定性 0.1M中性缓冲液中，120℃30min
保存温度 +4~30℃
保存 干粉,1g=3-4ml
三、保存
产品应密封贮存在4℃~30℃（保存溶液为20% 乙醇），通风、干燥、清洁的地方。可长期保存。
四、操作步骤：
1、装柱
（1）所需要用到的材料的温度要与色谱操作的温度一样，液体最好做脱气处理。填料可直接称量需要的
量用缓冲液溶涨一小时装柱即可。
（2）在柱子下端加入20%乙醇，以除去柱子中的空气，关闭柱子出口，在柱内保留少量的20%乙醇。20%
乙醇容易产生气泡，可以在里面加1%吐温避免气泡产生。也可以换成纯水装柱子，但是需要把填料中的20%
乙醇也换成纯水，具体的方法取需要体积的填料在抽滤漏斗上进行，也可以小心倾去填料上的20%乙醇，再
换成5 倍体积的纯水，反复沉淀去上清，5 次左右就可以用于装柱子。
（3）此填料颗粒比较细，所以一定要注意柱子要选择合适的筛网，不能漏，也可以取点填料加到筛网上
试试，如果没有问题再将填料连续倒入柱子时，要用玻璃棒的紧靠柱子内壁引流，以减少气泡的产生，让填
料先自然沉降到填料体积不再变化，而填料和上面的液体很好分层，上层溶液完全澄清，就可以开泵用适当
的流速压柱子，填料体积不再变化后，再把转换头紧顶在填料上就可以平衡柱子使用。使用的流速要小于装
柱子的流速。
（4）在装柱子前，填料从冰箱中取出至少要室温放置2-3 个小时，这样避免装柱子时由于温度变化而使
柱子中产生气泡。
2、蛋白的结合
样品的盐浓度和pH 要尽量和平衡柱子的缓冲液一致，盐浓度过高或者pH 带低也许挂不上，所以要根据
自己的样品做适当调整。
3、蛋白的洗脱
（1）样品用平衡液配制，浑浊的样品要离心和过滤后上样。盐浓度太大的样品处理后再配。
（2）一般情况是让目标产品结合在柱子上，用平衡液洗去杂质，再选择一种洗脱液洗下目标产品。
（3）介质对样品组分吸附的程度取决于样品的带电性质、流动相的离子强度和pH 值。盐浓度小，介质
对样品组分吸附较牢。用DEAE 介质时，推荐的pH 值是大于目标产品等电点1 个单位。
4、再生清洗
（1）每次用完最好用0.5MNaOH 含2M NaCl 洗 5 个床体积，再用水洗5 个柱床体积，然后用20%乙醇
保存，使用3-5 次后在水洗之后再用70%的乙醇或30%异丙醇都含1%吐温洗5 个柱床体积，最后20%的乙醇
流洗5 个柱床体积。
（2）有机溶剂和水混合很容易产生气泡，为了避免这样情况，可以把配好的有机溶剂在室温放置过夜，
再使用，这样可以避免气泡进柱子而导致柱子不能正常使用。

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