细胞简介
HL-1心肌细胞系是一只成年雌性近交系C57BLy 6J小鼠中切除的皮下肿瘤中建立，该小鼠为转染了由心房利钠因子启动子和SV40区域组成的融合基因的转基因小鼠。能够持续分裂和自发收缩，同时保持已分化的心脏表型。HL-1细胞可以连续传代且不会失去其分化的特异性心肌细胞表型，常用于研究正常心肌细胞在信号转导、细胞代谢和转录调控方面的功能，以及体外模拟诸如缺氧、高血糖-高胰岛素血症、细胞凋亡和缺血-再灌注等病理条件。

                      （中乔新舟HL-1细胞培养图 10X）

解锁心脏研究的钥匙
HL-1细胞系成为了科学家们研究心脏生理、病理及药物筛选的重要工具。然而，HL-1细胞的培养并非易事，今天，我们将为您揭开HL-1细胞培养的神秘面纱，并分享一些关键的注意事项，助您在心脏研究的道路上走得更稳、更远。
一、HL-1细胞培养的培养细节介绍
1. 培养基准备
HL-1细胞的生长依赖于特制的培养基，通常由以下成分组成：
· Claycomb培养基：这是HL-1细胞的标准培养基，需添加10%胎牛血清（FBS）。  (Sigma货号：51800C)
· 添加剂：包括去甲肾上腺素（0.1 mM）货号： CSP209、L-谷氨酰胺（2 mM）货号：CSP012。
· 推荐购买中乔新舟完全培养基：  货号 ZM0920。

2. 细胞的培养注意事项
· 该细胞贴壁性差，培养过程中会有一些圆形细胞。推荐使用Corning的高吸附cellbinding细胞培养瓶（货号：3289）进行细胞培养。或者使用明胶基质CSP132预包被培养瓶，37度孵育至少1小时后去除基质再进行细胞培养，或包被好放入4度备用。
· HL-1细胞培养生长至80% 即可传代。细胞消化时间略长，约8-15分钟细胞成纤维样细胞收缩分离脱落即可用完全培养液终止消化即可。
·  细胞培养过程中，培养基2-3天不进行换液，培养基会变深，变黑的现象，是正常现象。
· 为确保培养基的新鲜，建议完全培养基避光保存，减少添加剂的降解。
· 严格无菌操作，避免细菌、真菌或支原体污染。定期检测细胞是否被支原体污染，必要时使用支原体清除试剂处理。
3. 细胞信息
· 细胞特征：HL-1细胞应呈现典型的梭形或多边形部分贴壁不牢固的圆形，排列紧密。
· 倍增时间：~35-50 小时，生长缓慢，(80%汇合度T25瓶传2个T25培养瓶长满约4-6天)
· 换液频率：2~3次/周
4.细胞复苏
· 从液氮中取出冻存的HL-1细胞，迅速放入37℃水浴中解冻。(或用干冰盒转移到实验室)
· 将细胞悬液转移至含预温培养基的离心管中，轻轻混匀。(15ML离心管3ml)
· 以1000 rpm离心5分钟，弃上清，用新鲜培养基重悬细胞。（T25添加7ml）
· 将细胞接种于预先涂覆明胶的培养皿中，置于37℃、5% CO₂的培养箱中培养。
· 由于该细胞复苏后贴比率差，且形态不好看，我司决定HL-1细胞以冻存管的方式出售。
· 以下图片是我司客户收到冻存管复苏后第二天细胞图。复苏T25培养瓶后4-5天可进行传代处理。期间可换液一次。(T25瓶7ml培养基)。

（hl-1细胞复苏第二天，图片由手机拍摄，中乔客户提供）
5. 细胞传代
· 当细胞密度达到80%-90%时，即可进行传代。
· 弃去旧培养基，用PBS轻轻洗涤细胞。
· 加入0.25%胰酶-EDTA溶液，37℃消化8-15分钟。消化成流沙状成单个细胞脱落。
· 加入完全培养基终止消化，轻轻吹打细胞至单细胞悬液。
· 按1:2或1:3的比例将细胞接种至新的明胶包被培养皿中。
6. 细胞冻存
· 选择对数生长期的细胞，消化并收集细胞悬液。
· 以1000 rpm离心5分钟，弃上清。
· 用冻存液（90% FBS + 10% DMSO）重悬细胞，分装至冻存管中。
· 采用程序降温法或无血清冻存液，最后转移至液氮中长期保存。
二、HL-1细胞的应用前景
HL-1细胞因其独特的心肌细胞特性，在心血管研究中具有广泛的应用价值：
· 疾病模型构建：通过基因编辑或药物处理，模拟心肌肥厚、心律失常等疾病状态。
· 药物筛选：用于评估药物对心肌细胞的影响，加速新药研发进程。
· 分子机制研究：揭示心脏发育、代谢及信号通路的分子机制。
 
HL-1细胞的培养虽然具有一定的挑战性，但只要掌握正确的操作方法和注意事项，便能充分发挥其在心脏研究中的潜力。无论是探索心脏疾病的奥秘，还是开发新型治疗药物，HL-1细胞都将成为您科研路上的得力助手。让我们一起用心呵护这些“跳动”的细胞，为心血管健康贡献一份力量！