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上新 | RNA提取辅助试剂-完美替代氯仿

作者:翌圣生物科技(上海)股份有限公司 2024-06-04T00:00 (访问量:45522)

氯仿是Trizol试剂提取提取RNA的必需品。由于氯仿为易制毒类化学品,在订购、使用和储存等方面有很多的法律法规要求和限制。2019年7月23日,氯仿被纳入生态环境部国家卫生健康委员会发布的《有毒有害水污染物名录(第一批)》;2023年3月1日,氯仿又被纳入《重点管控新污染物清单(2023年版)》。氯仿有很强的麻醉作用,主要作用于中枢神经系统,造成肝,肾损害,已被流行病学证实为动物致癌物质,危害很大。氯仿即属于有毒试剂,又属于管制试剂,采购受到限制。怎么办呢?

 

翌圣生物推出RNA Extraction buffer RNA提取辅助试剂19203ES,该试剂安全、低毒,主要用于在Trizol、TRIeasyTM(10606ES)等RNA抽提过程中完美替代氯仿,快来一起了解下吧!

 

 

 

Trizol法提取总RNA

  基本原理  

Trizol试剂可以直接从组织或细胞中提取总RNA,该试剂的成分为异硫氰酸胍、酚、8-羟基喹啉和β-巯基乙醇。在样品裂解或匀浆的过程中,trizol试剂能迅速破碎细胞,抑制细胞释放出来的核酸酶且保持RNA的完整性。加入氯仿离心后,样品分为水相层和有机相层,RNA存在于水相层中,在酸性条件下总RNA保留在上层水相中。而大部分DNA和蛋白质保留在中间相或下层有机相中。收集上述水样层后,可通过异丙醇沉淀来回收RNA。此外,样品中的DNA和蛋白也能以沉淀的方式还原。乙醇沉淀能析出中间层的DNA,而在有机层中加入异丙醇能沉淀出蛋白。

 

 主要试剂和耗材  

Trizol    氯仿   异丙醇   乙醇   离心管 RNase-Free水  枪头

 

 实验流程图  

 

 

 

TRIzol 无氯仿解决方案

  01 

加1mL TRIeasyTM(Cat#10606ES)试剂,裂解样本,室温孵育5 min;

02 

加0.2 mL RNA Extraction buffer(Cat#19203ES) ,振荡混匀,孵育3 min;

03 

在4°C下12000×g离心样本15 min;

04 

取约500 μL上清液至新样本管中;

05 

加等样本体积的异丙醇,颠倒混匀,在4°C下孵育10 min;

06 

在4°C下12000×g离心10 min,弃上清;

07 

加1mL 75%乙醇,重悬沉淀,短暂涡旋样本,在4°C下7500×g离心5 min,弃上清液。此步骤重复一次;

08 

干燥5-10 min,加20-50 μL RNase-Free水,在55°C的水浴孵育10min。

 

 

 

19203ES

 

RNA Extraction buffer RNA提取辅助试剂

 

 产品亮点  

毒性低:本产品与氯仿的功能非常相似,但不含氯仿,相对毒性低,是氯仿的完美替代品;
分离效果好:本产品替代氯仿提取RNA,具有与氯仿媲美的分离效果;
使用方便、性价比高:每个样本添加200 μL,使用量与氯仿完全一致。

 

 产品性能  

采用TRIeasy™ Total RNA Extraction Reagent 10606ES提取10 mg鱼肝样本,实验组加入0.2 mL RNA Extraction buffer(Cat#19203ES),对照组加入0.2 mL氯仿,提取的RNA采用Nanodrop检测RNA的浓度和纯度,取5 μL进行琼脂糖凝胶电泳。结果如图所示,翌圣无氯仿提取后的RNA,含量高,纯度好,完整性指数高

 

 

订购信息

 

产品名称

产品货号

产品规格

RNA Extraction bufferRNA提取辅助试剂(完美替代氯仿)

19203ES60

100 mL 

 

 

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